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结核病患者外周血淋巴细胞亚群检测及临床应用专家共识

来源:旭光科星    浏览量:135    发布日期:2020-10-14      关键词:旭光科星  
结核病患者外周血淋巴细胞亚群

检测及临床应用专家共识

《中国防痨杂志》编辑委员会

中国医疗保健国际交流促进会结核病防治分会

基础专业和临床专业学术部



       doi:10.3969/j.issn.1000-6621.2020.10.001
       通信作者:吴雪琼,Email:xueqiongwu@139.com;初乃惠,Email:dongchu1994@sina.com
       文章来源:《中国防痨杂志》编辑委员会,中国医疗保健国际交流促进会结核病防治分会基础专业和临床专业学术部. 结核病患者外周血淋巴细胞亚群检测及临床应用专家共识. 中国防痨杂志,2020,42(10):1009-1016.

       【摘  要】 结核病(TB)的发生、发展及转归取决于入侵结核分枝杆菌(MTB)的数量、毒力及机体免疫抵抗力。通过流式细胞术分析TB患者外周血淋巴细胞亚群有助于评估患者的免疫状况、免疫功能和免疫平衡,为临床制定免疫干预措施、观察疗效及判断预后等方面提供实验室检测依据。本专家共识简要地介绍了我国临床常用的淋巴细胞亚群分析项目(包括百分比和绝对计数);提出了TB患者淋巴细胞亚群检测及结果正确判读的建议;简介了淋巴细胞亚群分析在TB患者临床诊疗中的用途,并对未来淋巴细胞亚群检测的发展前景进行了展望。
       【关 键 词】 结核;淋巴细胞亚群;流式细胞术;免疫;实验室技术和方法

       结核病(TB)是严重威胁人类健康的呼吸道传染病。TB发生、发展及转归取决于入侵结核分枝杆菌(MTB)的数量、毒力及机体免疫抵抗力。因此,对TB患者免疫状况的评估和了解其临床免疫学特征是近年来研究的热点之一。通过流式细胞术(flow cytometry,FCM)分析患者外周血淋巴细胞亚群是目前临床评估免疫功能的方法之一,有助于了解患者当前的免疫状态、免疫功能和免疫平衡,为临床制定免疫干预措施、观察疗效及判断预后等方面提供实验室检测依据。该项目在免疫性疾病、血液病、肿瘤和艾滋病等临床应用广泛,但在TB临床的应用较有限,认识不足。淋巴细胞亚群分析涉及多个指标,各指标之间关系复杂,如何正确解读、客观分析、科学判断结果,指导TB临床诊断和治疗,对于TB防控具有现实意义。为此,《中国防痨杂志》编辑委员会、中国医疗保健国际交流促进会结核病防治分会基础和临床专业学术部组织专家共同拟定《结核病患者外周血淋巴细胞亚群检测及临床应用专家共识》,提出可供临床借鉴的具体建议。

临床常用的淋巴细胞亚群分析项目

       目前,临床常规分析的人类外周血淋巴细胞亚群根据其细胞表面或细胞内独特的分化抗原(cluster of differentiation,CD)的表达可分为:T淋巴细胞(CD3+)、B淋巴细胞(CD19+)和自然杀伤(natural killer,NK)细胞(CD3-CD16+CD56+)。正常情况下,T细胞占淋巴细胞总数的65%以上,主要由αβT细胞(按T细胞受体分类)构成(占T细胞总数的90%~95%),是人类最重要的免疫效应细胞,其包括辅助性/诱导性T细胞(CD3+CD4+CD8-,也称CD4+ T细胞)、细胞毒/抑制性T细胞(CD3+CD8+CD4-,也称CD8+ T细胞)、双阳性T细胞(CD3+CD4+CD8+,简称DPT细胞)、双阴性T细胞(CD3+CD4-CD8-,简称DNT细胞)和NK样T细胞(CD3+CD16+CD56+,简称NKT细胞)等亚群。目前,通过FCM可分析各淋巴细胞亚群的相对计数(百分比)和绝对计数。

       一、检测原理
       应用各种荧光染料标记的单克隆抗体分别结合待检测血液标本中各类淋巴细胞膜表面或胞内独特的CD,然后通过流式细胞仪将染色后的血液细胞制成单细胞悬液,用一定压力将待检测样品压入流式细胞仪流动室,待测细胞在鞘液的包被下单行排列,依次通过流式照射室检测区域。激光照射到细胞上发生散射和折射,即产生散射光和激发荧光两种信号,荧光强度代表细胞表面的抗原量。通过流式细胞仪识别和分辨这些荧光,实现对各类淋巴细胞分化抗原的定量检测。通过检测不同标记的细胞亚群的荧光强度,可判断目的细胞群在总淋巴细胞群中的百分比。而应用细胞亚群绝对计数管进一步分析血细胞样本,根据管中准确定量的标准内参荧光微球数,可对淋巴细胞各个亚群进行绝对计数。

       二、检测方法
       参考原中华人民共和国卫生部2011年12月14日发布的中华人民共和国卫生行业标准《WS/T 360—2011 流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群指南》进行淋巴细胞亚群分析、相对计数和绝对计数。
       1.淋巴细胞亚群相对计数法:在普通上样管中加入荧光染料标记的单克隆抗体,然后加入抗凝血样本,涡旋混匀,室温避光放置15 min;加入溶血素,涡旋混匀,室温避光放置10 min;离心弃掉上清液;加入磷酸盐缓冲液(phosphate buffer saline,PBS)洗涤,涡旋混匀,离心弃上清;加入PBS,混匀,上机检测。在操作系统中输入基本信息,设置模板圈门,分别圈出总淋巴细胞、T细胞(CD3+)、辅助性T细胞(CD3+CD4+)、杀伤抑制性T细胞(CD3+CD8+)、NKT细胞(CD3+CD16+CD56+)、NK细胞(CD3-CD16+CD56+)、B细胞(CD3-CD19+),获取淋巴细胞门下至少5000个细胞,在软件中即可获得各个亚群占总淋巴细胞群的相对百分比。
       2.淋巴细胞亚群绝对计数法:在绝对计数管中加入荧光染料标记的单克隆抗体,然后于管中反向加入50 μl抗凝血样本,涡旋混匀,室温避光放置15 min;加入450 μl溶血素,涡旋混匀,避光放置10 min后,再次混匀后上机检测;在上述相对计数法设置的模板下增加荧光微球门,在淋巴细胞门下获取至少5000个细胞,在软件中获得各个亚群占总淋巴细胞群相对百分比的同时,获得各亚群细胞获取数与荧光微球获取数。依据绝对计数管中准确定量的标准内参荧光微球总数,通过如下公式计算各细胞亚群绝对值:亚群细胞数/μl =(亚群细胞获取数×荧光微球总数)/(荧光微球获取数×样本量)。

       三、检测报告内容
       应用FCM常规分析下列淋巴细胞亚群:T细胞(CD3+、CD4+、CD8+、DPT、DNT和NKT)、NK细胞和B细胞后,建议报告各个细胞亚群细胞的相对计数(百分比)和绝对计数。常见的检测报告内容见图1。

       四、检测注意事项
       1.流式检测仪器及抗体试剂的质量保证:保证流式检测仪器的正常运行,以及淋巴细胞亚群检测试剂质量可靠是临床获得客观、稳定的检测数据的前提条件。因此,建议所使用的流式细胞仪和淋巴细胞亚群试剂盒均需获得临床医疗注册证书。
       2.标本采集:FCM检测淋巴细胞亚群采用外周血标本,建议抗凝剂首选乙二胺四乙酸盐(EDTA-K2/EDTA-K3),该抗凝标本在室温下保存12~24 h,不超过30 h,以免粒细胞减少;也可选择肝素钠或柠檬酸钠抗凝,该标本可在室温下保存48 h。标本中极少的凝血块均会造成结果的差异,因此检测前应该仔细观察标本是否有凝血。
       3.审核内容:建议检验报告时审核人员应对检验过程中的关键步骤进行审核,如模板的设置、采集的细胞数和荧光微粒数、散射光模式、所有的设门等。
       4.报告结果的参考值范围:临床检验结果的参考值范围是临床医生合理地解释结果、判断患者免疫状况正常与否的重要标准。临床实验室为临床医生提供的参考值范围应正确适用,以免误诊或漏诊,导致错误的治疗。目前,国内FCM淋巴细胞亚群检测结果的参考值范围来源以试剂及仪器厂家说明书居多,少数实验室自己确定,也有根据其他实验室所提供的参考值范围。然而参考值范围尤其是绝对计数的参考值范围受性别、年龄、种族、营养和环境差异的人群,以及仪器类型及试剂来源的不同而存在差异。因此,建议各实验室需针对不同型号的仪器和不同厂家的试剂科学合理地建立区域人群淋巴细胞亚群检测结果的参考值范围及评价体系,男性和女性、成人和儿童应分别建立参考值范围,每年还应采用20名健康人血液标本进行验证和调整。

淋巴细胞亚群分析在TB患者

临床诊疗中的应用


      TB的发生、发展与机体免疫功能失衡有关,机体免疫系统在TB的发病、发展及转归方面扮演重要的角色,直接影响患者预后。淋巴细胞通过多种功能效应在感染性疾病中起着抵抗侵入病原菌的重要作用,淋巴细胞亚群的改变会影响肺部疾病的发生和发展。检测淋巴细胞亚群水平对了解TB患者机体免疫功能、判断病情严重程度及评估预后等方面都有重要意义。因此,对淋巴细胞亚群分析在TB患者临床诊疗中的应用提出以下意见和建议。

      一、评估TB患者的免疫状况
      下列TB患者有必要进行淋巴细胞亚群分析,以辅助临床客观评价患者免疫状况,合理制定治疗方案,适时进行免疫干预,调节患者的免疫功能,促进患者早日康复。
      1.老年TB患者:我国第五次流行病学抽样调查发现肺结核患者中老年人(>60岁)所占比率高达48.8%。50%左右的老年肺结核患者各淋巴细胞亚群绝对计数均低于健康人,尤其是CD3+、CD4+、CD8+、NKT和B淋巴细胞绝对计数明显低于中青年患者;而反映固有免疫的NK细胞与年龄无明显相关性,说明老年肺结核患者由于适应性免疫功能降低,因而通常症状不典型、耐药率高、化疗后痰菌涂片阴转率低、不良反应多、治疗效果差、病程长。因此,建议在老年TB患者中进行淋巴细胞亚群分析以了解其免疫状况,更好地应对和控制TB。
      2. 活动性TB患者:1/3~1/2的活动性TB患者外周血中各淋巴细胞亚群绝对计数均低于健康人,病情越严重,下降越明显,如耐多药或病变范围广泛的TB患者各淋巴细胞亚群绝对计数均明显降低。复治肺结核患者各淋巴细胞亚群降低的发生率和降低的程度均高于初治肺结核患者。因此,建议病情严重的活动性TB患者进行淋巴细胞亚群分析,以判断是否需进行免疫干预。
      3. 糖尿病并发活动性肺结核患者:糖尿病患者并发活动性肺结核的发病率增高,其代谢紊乱及免疫损伤等发病机制促进了肺结核的发病和发展。反之,TB也加重了糖尿病患者的代谢紊乱,近10%的初治肺结核患者并发糖尿病。糖尿病与活动性肺结核之间由于血糖水平、机体免疫力等因素相互作用,构成了互为因果的恶性循环。糖尿病并发肺结核患者的CD3+ T细胞、CD4+ T细胞、CD8+ T细胞和B细胞绝对计数降低的发生率明显高于未并发糖尿病的肺结核患者;其中CD8+ T细胞和B细胞绝对计数降低的程度也明显高于未并发糖尿病的肺结核患者。糖尿病并发TB患者的NKT细胞百分比或绝对计数明显高于没有糖尿病的TB患者。因此,建议糖尿病并发活动性TB患者进行淋巴细胞亚群分析。
      4. HIV与MTB双重感染者:HIV感染者CD4+ T淋巴细胞明显下降,并发MTB感染可提高HIV病毒的侵袭和复制能力,并提高CD4+ T淋巴细胞对HIV的易感性,加速HIV感染的疾病进程。HIV与MTB双重感染者艾滋病发病的风险高,TB已成为艾滋病高流行地区的最重要的单一死因。有效的抗结核治疗可使HIV感染与艾滋病并发肺结核患者的淋巴细胞亚群绝对计数恢复正常,提高其细胞免疫功能,并可使TB得到良好的控制,从而改善预后,提高生存质量、延长寿命。因此,建议HIV与MTB双重感染者进行淋巴细胞亚群分析,以了解患者的免疫状况和监测治疗效果。
      5. 其他:并发肿瘤、贫血、低蛋白血症等重症TB患者各淋巴细胞亚群降低的发生率和降低的程度均明显高于未并发的肺结核患者。因此,建议并发肿瘤、贫血、低蛋白血症等重症TB患者也进行淋巴细胞亚群分析,以便适时干预和提高治疗效果。

       二、监测肺结核患者的治疗效果
       临床上TB尤其是MDR-TB、重症TB患者均可能出现各淋巴细胞亚群的百分比或绝对计数和功能的改变。TB患者接受有效化疗后,其淋巴细胞亚群百分比尤其是绝对计数若改善或恢复正常,一般疗效较好、康复快、预后好;其淋巴细胞亚群百分比尤其是绝对计数若没有改善,一般疗效较差,病程长、预后差,且有反复发作的可能。因此,建议上述活动性TB患者治疗前、后进行淋巴细胞亚群分析,以作为制定免疫治疗方案的实验依据和监测疗效的指标。

       三、TB患者进行外周血淋巴细胞亚群检测的指征
       鉴于以上观点,建议活动性TB患者在治疗前后进行外周血淋巴细胞亚群检测的指征为:(1)老年活动性TB患者;(2)复治、久治不愈的TB患者;(3)病变范围广泛的、病情严重的TB患者;(4)并发反复感染、严重感染,尤其并发HIV感染的TB患者;(5)并发糖尿病的活动性TB患者;(6)并发肿瘤、贫血、低蛋白血症的活动性TB患者;(7)有免疫缺陷病家族史、长期使用免疫抑制剂的活动性TB患者。

TB患者淋巴细胞亚群检测结果的

判读及其临床意义


       机体的免疫状况决定了MTB感染后TB的发生、发展和转归,T淋巴细胞亚群与细胞免疫功能有关,B淋巴细胞与体液免疫功能有关,NK细胞与非特异性自然杀伤活性有关。在现有科学证据的基础上,对应用FCM检测TB患者淋巴细胞亚群结果的判读及其临床意义提出以下意见和建议。
       1. 总T淋巴细胞(CD3+):T淋巴细胞参与机体细胞免疫应答,外周血CD3+百分比或绝对计数值低于参考范围,说明T淋巴细胞数可能减少,提示可能存在免疫功能低下。活动性TB患者CD3+ T细胞的百分比和绝对计数值可能没有明显变化,也可能降低,而且病情越严重,下降越明显;如低蛋白血症、贫血、并发糖尿病、耐多药或病变广泛的TB患者,其外周血CD3+T细胞数明显降低;≥60岁TB患者的CD3+ T细胞百分比或绝对计数可能明显低于<60岁的患者。CD3+ T细胞的百分比或绝对计数值明显下降,说明患者出现明显的免疫抑制。
       2. 辅助性/诱导性T淋巴细胞(CD3+CD4+CD8-):CD4+ T淋巴细胞在TB病程各个阶段均发挥主要的抗结核作用。CD4+ T淋巴细胞主要辅助其他细胞产生免疫应答效应或调节免疫应答。目前CD4+ T细胞根据诱导因子和分泌因子的不同,主要分为辅助性T细胞(helper T cells,Th)1、Th2、Th17细胞和调节性 T 细胞 (regulatory T cells,Treg)等4类。Th1细胞分泌白细胞介素(IL)-2、γ干扰素(IFN-γ)和肿瘤坏死因子(TNF)-α等细胞因子,这些细胞因子能激活巨噬细胞和淋巴细胞,提高巨噬细胞杀伤细菌的功能,诱导细胞免疫反应;Th2细胞分泌IL-4、IL-5、IL-6、IL-10等细胞因子,这些细胞因子主要激活体液免疫系统,也引起超敏反应炎症。活动性TB患者CD4+ T细胞百分比或绝对计数可能低于健康人,病情越严重,下降越明显,如低蛋白血症、贫血、并发糖尿病、耐多药或病变广泛的TB患者CD4+ T细胞绝对计数明显降低;此外,≥60岁TB患者的CD4+ T细胞百分比或绝对计数可能明显低于<60岁的患者。CD4+ T细胞百分比或绝对计数明显下降,表明CD4+ T细胞功能缺失,将削弱机体抗MTB的保护性防御机制,是TB患者免疫状态恶化的一种表现形式。潜伏性结核感染者若出现外周血CD4+ T细胞耗竭,就易导致MTB再活化。
       3. 细胞毒/抑制性T淋巴细胞(CD3+CD8+CD4-):CD8+ T淋巴细胞主要执行细胞免疫功能,是排斥同种异体移植物、杀伤细菌、病毒感染细胞和肿瘤细胞的效应细胞。其可以特异性地识别内源性抗原肽-主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)Ⅰ类分子复合物,进而杀伤靶细胞(细胞内寄生病原体的细胞或肿瘤细胞)。杀伤机制主要有两种:一是分泌穿孔素、颗粒酶、颗粒溶素及淋巴毒素等物质直接杀伤靶细胞;二是通过Fas/FasL途径诱导靶细胞凋亡。活动性TB患者CD8+ T细胞百分比可能没有明显变化,或明显增高,这是由于CD4+ T细胞百分比明显降低所致。活动性TB患者CD8+ T细胞绝对计数可能低于或高于健康人,也可能无明显变化,与患者病情相关;CD8+ T细胞绝对计数无论是增高还是降低均预示可能预后不良,需进行免疫干预。病情越严重(如老年、低蛋白血症、贫血、并发糖尿病或病变广泛的TB患者),下降越明显。CD8+ T细胞绝对计数明显下降,表明机体调动CD8+ T细胞直接杀灭胞内外MTB而导致CD8+ T细胞大量消耗,是TB患者免疫状态恶化的一种表现形式。若发病早期不及时对患者进行治疗和免疫干预,可能导致CD8+ T细胞计数不断下降,从而导致病情加重或呈慢性感染。CD8+ T细胞绝对计数增高可能是患者MTB负荷高所致,可能预示患者对化疗反应迟缓。
       4. CD4+/CD8+比值:显示辅助性/诱导性T淋巴细胞与细胞毒/抑制性T淋巴细胞之间功能平衡状态,是评价人体免疫系统内环境是否稳定的重要指标。CD4+/CD8+比值升高提示免疫功能亢进,见于类风湿性关节炎、糖尿病等。CD4+/CD8+比值减低提示免疫抑制,艾滋病患者的CD4+/CD8+比值多在0.5以下。活动性TB患者CD4+/CD8+比值可能正常、减少或增高,取决于患者CD4+、CD8+ T细胞下降的程度。若CD4+/CD8+比值低于健康人,表明CD4+ T细胞较CD8+ T细胞下降明显;病情严重的患者CD4+/CD8+比值可能高于病情较轻的患者,可能是因为CD8+ T细胞较CD4+ T细胞下降明显所致。
       5. 双阳性T淋巴细胞(DPT细胞,CD3+CD4+CD8+):正常人外周血中DPT细胞极少,但是在重症肌无力、原发性免疫性血小板减少症、多发性硬化症等自身免疫性疾病中表达增高。肺结核患者外周血DPT细胞具有抗结核免疫力,活动性TB患者DPT细胞百分比可能正常、增高或减少,其绝对计数可能明显降低,提示抗结核免疫力下降,其变化的临床意义尚需进一步探讨。
       6. 双阴性T淋巴细胞(DNT细胞,CD3+CD4-CD8-):DNT细胞具有免疫抑制功能并能诱导耐受,抑制具有相同T细胞受体的CD8+ T细胞和CD4+ T细胞的功能,以预防体内过度亢进的细胞免疫应答所造成的免疫损伤。外周血DNT升高主要见于临床炎症性疾病,包括感染性和非感染性疾病,如:肺部细菌性感染、全身性病毒感染、胸膜炎、创伤、急性扁桃体炎等疾病;此外,青少年患者的增高幅度较其他年龄段的患者高。DNT细胞是急性感染、严重创伤等患者体内免疫功能状态和病情监测的一个新指标。活动性TB患者DNT细胞百分比和绝对计数可能减少,病情越严重,下降越明显,可能是因为机体通过DNT数量下降使机体免疫抑制功能降低,以提高MTB清除能力;≥60岁TB患者的DNT细胞绝对计数可能明显低于<60岁的患者。
      7. NKT细胞(CD3+CD56+CD16+):NKT细胞是T淋巴细胞中的一个比较特殊的亚群,兼具T细胞和NK细胞的某些特性,是一类在固有免疫和适应性免疫之间起桥梁作用的免疫调节细胞,活化后能迅速分泌一些具有免疫调节作用的细胞因子并且具有潜在的细胞毒效应;参与体内免疫调节、维持免疫稳定,参与体液免疫应答或细胞免疫应答,能防止自身免疫性疾病的发生,并在抗感染、抗结核和抗肿瘤免疫及防止器官移植排斥中发挥重要作用。原发性肺结核NKT细胞数一般无明显变化,其他类型的活动性TB尤其是血行播散性肺结核患者NKT细胞百分比或绝对计数明显增高,糖尿病并发TB患者的NKT细胞百分比或绝对计数明显高于没有糖尿病的TB患者,这可能是由于体内MTB含量高、分布广泛,诱导机体产生NKT细胞抗结核。但随着病情加重NKT细胞会逐渐减少。
      8. NK细胞(CD3-CD56+CD16+):NK细胞是固有免疫的关键组成部分,但也发挥适应性免疫作用,其主要功能为杀死各种肿瘤细胞和某些感染细菌、病毒的细胞,所以在抗肿瘤和抗感染防御疾病中起主要作用;它还可以分泌IFN-γ等细胞因子参与免疫应答调控。原发性肺结核NK细胞百分比和绝对计数一般无明显变化,其他类型的活动性TB患者NK细胞绝对计数可能明显减少,其自然杀伤功能也可能明显降低;而且病情越严重,下降越明显;复治肺结核患者的NK细胞绝对计数明显低于初治肺结核患者;血行播散性肺结核及肺外结核患者NK细胞百分比或绝对计数降低的发生率和降低程度均明显高于单纯肺结核患者。
      9. B淋巴细胞(CD3-CD19+):B淋巴细胞活化后转化为浆细胞,分泌抗体,主要执行体液免疫功能,在抗结核感染中发挥主要作用。B细胞也参与结核肉芽肿形成,B细胞功能缺陷的宿主更易受到MTB感染、TB易感性增加。活动性TB患者病情严重时(如并发糖尿病、贫血、低蛋白血症或病变广泛的患者)B淋巴细胞百分比和绝对计数均明显下降,而且随着患者年龄增长而逐渐降低,尤其是60岁以上的患者下降明显。

对TB患者淋巴细胞亚群检测与分析的

建议和展望

       1. 合理选择淋巴细胞亚群检测与分析的方法:相对计数法是分析各亚群细胞占总淋巴细胞数的百分比,结果易受各类细胞亚群变化的影响;而绝对计数法可了解各类细胞亚群的独立变化,一种淋巴细胞亚群绝对计数的变化不会影响其他细胞亚群绝对计数的变化,但可能影响淋巴细胞亚群相对计数的变化,因此,只分析各淋巴细胞亚群的百分比不能客观、准确地反映TB患者的免疫功能状况,建议同时检测与分析淋巴细胞亚群的相对计数和绝对计数。

       2. TB患者进行淋巴细胞亚群检测的建议:原则上免疫功能受损者均应常规评估淋巴细胞亚群,但目前TB患者的免疫功能评价在临床上并未获得广泛重视;因此,建议活动性TB患者尤其是存在下列情况的患者应进行淋巴细胞亚群分析:(1)并发反复感染、严重感染及多种病原体与特殊病原体感染者,尤其是并发HIV感染的患者;(2)常规抗结核治疗效果不佳的患者,除了考虑耐药等原因外还应考虑是否存在宿主免疫功能受损;(3)并发严重的过敏性疾病或自身免疫性疾病的患者,可能存在免疫自稳和耐受功能受损;(4)并发血液系统肿瘤或者其他肿瘤及实体瘤患者,可能存在免疫监视功能受损;(5)其他特殊情况,即TB患者血常规中淋巴细胞明显异常、家族成员中有免疫缺陷病史、长期使用免疫抑制剂者,以及TB并发糖尿病、低蛋白血症及贫血的患者。

       3. 建立新的基于多色FCM检测T淋巴细胞亚群的方法:目前临床检测分析淋巴细胞亚群的数目和分类有限,对淋巴细胞亚群功能的评价不足,尚缺乏将T细胞亚群表型和功能联合分析的工具,而不能完全满足临床需求;需研发新的针对TB患者临床免疫学特征的淋巴细胞亚群的分析指标和方法,以指导临床诊疗。

       随着FCM在TB患者检测中的不断研究和应用,相信这项技术能够为TB临床诊断和治疗提供更多有价值的实验室检测依据。

       参与讨论与撰写本共识的主要单位和专家(排名不分先后):100091 北京,解放军总医院第八医学中心 全军结核病研究所(吴雪琼、白雪娟、梁建琴、张俊仙);200433 同济大学附属上海市肺科医院结核病中心(肖和平、范琳);101149 首都医科大学附属北京胸科医院(初乃惠、张宗德、黄海荣、逄宇);100035 北京,《中国防痨杂志》期刊社(薛爱华、李敬文、范永德);102206 北京,中国疾病预防控制中心结核病预防控制中心(赵雁林);100710 北京,中国防痨协会秘书处(成诗明);100035 北京市结核病控制研究所实验室(王甦民、丁北川);510095 广州市胸科医院(谭守勇、谭耀驹);400036 重庆市公共卫生医疗救治中心(严晓峰、李同心);710061 西安市结核病胸部肿瘤医院(党丽云、崔小莉);215007 苏州市第五人民医院(吴妹英、胥萍、张建平);410013 长沙,湖南省胸科医院 湖南省结核病防治所检验科(谭云洪);110044 沈阳市胸科医院中西医结合病房(梁秋);518112 深圳市第三人民医院结核科(邓国防、邓群益);610061 成都市公共卫生临床医疗中心(吴桂辉)

      参 考 文 献 略
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